天津双检测模式超微量分光光度计试用

时间:2024年02月21日 来源:

分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系如下式:A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc式中 :A 为吸光度;I0为入射的单色光强度;I 为透射的单色光强度;T 为物质的透射率;k 为摩尔吸收系数;L 为被分析物质的光程,即比色皿的边长;c 为物质的浓度;物质对光的选择性吸收波长,以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后可用同样条件将该供试品配成溶液,测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区,除某些物质对光有吸收外,很多物质本身并没有吸收但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多,且常使用单色光纯度较差的仪器,故测定时应用标准品或对照品同时操作。MicroDrop基座模式下光程1.0、0.2、0.1和0.05mm自动调整。天津双检测模式超微量分光光度计试用

物质的吸收光谱:如果在光源和棱镜之间放上某种物质的溶液,此时在屏上所显示的光谱已不再是光源的光谱,它出现了几条暗线,即光源发射光谱中某些波长的光因溶液吸收而消失,这种被溶液吸收后的光谱称为该溶液的吸收光谱。不同物质的吸收光谱是不同的.因此根据吸收光谱,可以鉴别溶液中所含的物质。当光线通过某种物质的溶液时透过的光的强度减弱,因为有一部分光在溶液的表面反射或分散,一部分光被组成此溶液的物质所吸收只有一部分光可透过溶液。入射光= 反射光 + 分散光 + 吸收光 + 透过光。如果我们用蒸馏水(或组成此溶液的溶剂)作为"空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的损失则:入射光 = 吸收光 十 透过光。江苏超微量分光光度计试用A320nm 或A340nm——是基线校准波长,为检测溶液样品的浊度和其他干扰因子。

Micro Drop蛋白质检测功能:Protein Bradford检测方式:Bradford是常用的蛋白定量检测的方法。它通常用于浓度比较低的蛋白的浓度检测。与其他比色法一样,Bradford法检测蛋白浓度时必须构建一个标准曲线。Bradford法是根据蛋白质在酸性溶液中,能够使考马斯亮蓝结合,使得染料的比较大吸收峰值变更为595nm来检测蛋白浓度。检测蛋白-染料复合物在595nm处的吸光值,并在750nm处做基线校正,计算得出蛋白的浓度。常规检测使用试剂/蛋白样品的体积比为50:1,检测浓度范围为0.10mg/ml到8.0mg/ml(BSA),比较好线性浓度范围在0.01-1mg/ml。当使用基座检测时,推荐使用4μl样品和200μl Bradford试剂。微量检测使用试剂/样品的体积比为1:1,可以检测蛋白浓度范围从15ug/ml至125ug/ml。要准备足够的样品来做基座检测,建议使用10μl样品和10μlBCA试剂(使用PCR管)。 按照试剂盒生产厂家的说明来准备标准品和和构建标准曲线。确保在所有检测过程中,每个样品的处理时间及环境温度一致。

超微量分光光度计的应用:
(一)核酸的定量:
核酸的定量是超微量分光光度计使用频率比较高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链DNA、双链DNA,以及RNA。核酸的比较高吸收峰的吸收波长260nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应消光因子。如:1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。除了核酸浓度,分光光度计显示几个非常重要的比值表示样品的纯度,如A260/A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。
朗伯一比尔(Lambert - Beer)定律是分光光度法定量分析依据的基本原理。

Micro Drop蛋白质检测功能:Protein Pierce 660nm检测方式:Protein Pierce 660nm主要用来定量检测那些含有还原剂或者去污剂的总蛋白浓度,使用的的试剂/样品体积比例为15:1。当使用基座检测时,推荐使用4μl样品和60μl试剂。按照试剂盒生产厂家的说明来准备标准品和和构建标准曲线。确保在所有检测过程中,每个样品的处理时间及环境温度一致。可以从试剂盒生产厂家购买用于构建标准曲线的蛋白标准品(BSA)。当使用4μl样品和60μl试剂时,Pierce 660nm可以检测的浓度范围为50ug/ml到125ug/ml。样品的吸光值与样品的浓度成正比。吉林性能稳定超微量分光光度计核酸检测

不同物质的吸收光谱是不同的.因此根据吸收光谱,可以鉴别溶液中所含的物质。天津双检测模式超微量分光光度计试用

Micro Drop 超微量分光光度计:
Micro Drop为一款全光谱波长(185~910nm)超微量分光光度计,创新的基座和比色皿上样双检测模式,适用于更宽浓度范围的样品检测,操作简便,即擦即测,无昂贵耗材,广泛应用于分子生物实验中DNA,RNA,蛋白的检测等,也用于一般物质分析中的吸光度检测。
高灵敏度:采用新一代的2048线性CCD检测单元,拥有更高的灵敏度和精确度。
高重复性:步进电机结合独有的双重轨迹精确定位(DPTL) 技术使光程的精度达到0.001mm,实现吸光度检测的高重复性。
全光谱波长:波长范围185-910nm,可检测更多的样品种类,更宽的近红外波长范围,适应多样化的检测要求。
智能检测:上样后合上检测上臂,无需点击软件界面的检测图标,即可自动检测,为用户节约检测时间。
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