天津纳米荧光染料
CY7是一种CY染料。CY为花菁(Cyanine)的缩写,是由奇数个甲基单元连接的两个氮原子组成的化合物。菁类化合物具有波长长、吸收和发射可调、消光系数高的特点CY系染料常被用于蛋白、抗体以及小分子化合物的标记,对于蛋白抗体的标记,可以通过简单的混合反应来完成结合,下面我们介绍了蛋白抗体标记的标记方法,具有一定的参考意义。一、比较好蛋白制备1)为获得标记效果,请制备蛋白(抗体)浓度为2mg/mL。2)蛋白溶液的pH值为8.5±0.5。如果pH值低于8.0,应使用1M3)如果蛋白浓度低于2mg/mL,标记效率会**降低。为获得比较好标记效率,建议**终蛋白浓度范围为2-10mg/mL。4)蛋白必须在不含伯胺(如Tris或甘氨酸)的缓冲液中,和铵离子,否则会影响标记效率。2.染色制备(以CY3-NHS酯为例)将无水DMSO加入CY3-NHS酯小瓶中,制备成10mM储备液。通过移液器或涡旋混合均匀计算。使用前需先使用缩合液(500μg/mL)(HY-D0178)活化另一个可进行后续标记实验。罗丹明123一种可对活细胞线粒体染色的细胞染色试剂。天津纳米荧光染料
1.DiD,DiO,DiI,DiR和DiS细胞膜染色液制备(1)配置DMSO或EtOH储存液:储存液用DMSO或EtOH配置浓度1~5mM。注意:未使用的储存液保存在-20°C,避免反复冻融。(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5µM的工作液。注意:工作液的**终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找比较好条件。
2.悬浮细胞染色(1)悬浮细胞密度为1×106/mL加入到工作液中。(2)在37℃培养细胞2~20分钟,不同的细胞比较好培养时间不同。(3)染色细胞试管在1000~1500转离心5分钟。(4)倾倒上清液,再次缓慢加入预温37℃的培养液。(5)重复(3),(4)步骤两次以上。 西藏国产荧光染料Hoechst 33342是一种可透过细胞膜并对DNA染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光。
荧光染料在细胞实验中具有广泛的应用1、细胞膜标记:可以使用荧光染料标记细胞膜,以观察和研究细胞膜的动态和结构变化。2、染色体和DNA标记:用荧光染料标记染色体或DNA,可以观察和分析DNA复制、转录、修复等过程3、蛋白质标记:通过荧光染料标记蛋白质,可以研究蛋白质的相互作用、定位和运动等特性。4、细胞器标记:使用特定波长的荧光染料可以标记和可视化细胞中的线粒体、溶酶体等细胞器。5、神经科学应用:荧光染料在神经科学中也有广泛应用,如标记神经元和突触,观察神经信号的传递等。6、基因表达分析:通过荧光染料标记基因表达产物,可以定量分析基因的表达水平和细胞中的分布情况。
如何选择的染料?
考虑到荧光染料种类繁多,您如何为您的特定应用选择使用哪种染料?以下是您需要考虑的一些因素。※与实验设计的兼容性:虽然它们可能与其他荧光团共享一些光谱相似性,但每种染料都是***的,并且具有不同的功能、激发和发射波长、波段形状和宽度以及光稳定性。为确保成功,请选择与您的实验设计相辅相成的一种。与设备的兼容性:选择与您正在使用的照明源相匹配的染料。在选择合适的荧光仪器时,请考虑仪器的灵敏度、动态范围、稳定性和通量、信噪比和信空白比。为了获得更好的结果,请确保染料的发射曲线与可用的检测方法相匹配。与样品中其他荧光材料的相容性:在双重或三重标记实验中,您选择的染料的发射和激发曲线不应与其他荧光团重叠。由于许多天然存在的细胞成分会以与您选择的染料或探针相同的波长发出荧光,因此您还需要确保可以从背景自发荧光中清楚地识别所选染料产生的信号。 Super Fluor 555(效果同Alexa Fluor 555)琥珀酰亚胺酯荧光染料。
5(6)-FITC(Fluorescein5(6)-isothiocyanate)是一种胺活性衍生物的荧光染料,具有广泛的应用,作为抗体和其他探针标记,用荧光显微镜,流式细胞仪、免疫荧光方法如ELISA和Western印迹实验。荧光素衍生物具有高吸收率、优异的荧光量子产率和良好的水溶性,是流式细胞仪和免疫荧光中生物检测**常用的荧光标记之一。**常用的荧光素包括用于标记蛋白质(特别是抗体)的异硫氰酸荧光素[5(6)-FITC)],5-FITC和用于标记肽和寡核苷酸的羧基荧光素(5-FAM和5(6)-FAM)。BIOFOUNT提供***的基于荧光素的染料、底物和偶联物,以及一系列具有针对细胞标记和检测优化的特性的质量iFluor™荧光标记染料。吲哚菁绿的主要作用之一是在医学影像学中作为造影剂。苏州荧光染料luc
FITC荧光染料标记方法。天津纳米荧光染料
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度**增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,比较好浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜**分明显:DiI(橙色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红色荧光)和 DiR (深红色荧光)这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分别用标准的 FITC和TRITC的滤光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激发,有着比DiI更长的激发波长和发射波长,在细胞和组织染色中更有价值。 DiR的红外荧光可以穿透细胞和组织,在***成像中用来示踪。天津纳米荧光染料
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