天津**组胚病理切片

制作组胚病理切片保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。 保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。 制作病理切片固定 (1)小块组织固定法:这是相当常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4~20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。 (2)注射、灌注固定法:某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入内部，或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。这时宜采用注射固定或灌注固定法。将固定液注入血管，经血管分支到达整个组织和全身，从而得到充分的固定。 (3)蒸汽固定法:比较小而厚的标本，可采用锇酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片，则应在血片未干燥前采用锇酸或甲醛蒸汽接触固定。 相当常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。天津**组胚病理切片

制作病理切片浸蜡、包埋 (1)使石蜡浸入组织中，取代组织中含有的透明剂。 (2)包埋:将浸蜡后的组织置于融化的固体石蜡中，石蜡凝固后，组织即被包在其中，称蜡块，此过程称为包埋。 5.制作病理切片切片和贴片 (1)修整蜡块:可视其组织的大小，在组织边缘约0.1~0.2cm处，切去余蜡部分，否则易造成组织皱缩不平。 (2)准备好切片用具:切片刀、毛笔、眼科镊子(弯)、漂烘温控仪 (3)安装蜡块:将修好的蜡块安装在金属或木制持蜡器上。 (4)安装切片刀:将切片刀安装在切片机的刀台上，把刀台上的紧固螺丝旋紧，使切片时不产生振动，能保持一定的切片厚度。 (5)切片的厚度:切片机的厚度调节器上刻有0~50μm或0~25μm，可任意选择其厚度，石蜡切片的厚度一般在4~6μm。 (6)切片 (7)铺片:用眼科镊子镊起蜡带轻轻平铺在40~45℃的水面上，借水的张力和水的温度，将略皱的蜡带自然展平。 (8)贴片、烘片:待切片在恒温水面上充分展平后，将蜡片捞到载玻片的中段处倾去载玻片上的余水，置入60~65℃恒温箱内或切片漂烘温控仪的烘箱内烤片15~30分钟，脱去溶化组织间隙的石蜡。甘肃组胚病理切片

取一定大小的病变组织，用病理组织学方法制成病理切片〔通常将病变组织包埋在石蜡块里，用切片机切成薄片，再用苏木精－伊红(H-E)染色〕,用显微镜进一步检查病变。 病变的发展过程，***作出病理诊断。制作时将部分有病变的组织或脏器经过各种化学品和埋藏法的处理，使之固定硬化，在切片机上切成薄片，粘附在玻片上，染以各种颜色，供在显微镜下检查，以观察病理变化，作出病理诊断，为临床诊断和提供帮助。在常规组织制片中，切片是相当重要的技术之一，其质量好坏直接影响标本的观察效果。好的切片机是整个制备过程的重要环节，要制备1张好的切片，病理工作人员必须将技术、知识和技巧进行完美的结合。首先，待切样品的质量是关键因素，而样品质量取决于前期处理工作的准确无误，包括固定、脱水、包埋等[2]；必须选择正确型号的切片机以及合适的钢刀或一次性刀片；切片时需认真考虑样品类型、大小、厚度，兼顾操作者的便利性和舒适性。其次，要切出高质量的切片，操作者丰富的经验必不可少。操作者必须懂得切片机的工作原理，对机器进行精细调节以达比较好效果；能应对常见故障，一些潜在的影响因素

切片出现空洞 此种情况 ,不仅影响切片的 美观 ,更主要的是易给病理医生的诊断造成遗漏。如果随着蜡带连续深切 ,空洞越变越小 ,说明切片中的空洞是没有切全而造成的人为改变。当切蜡块用的力太大太猛时 ,组织中的小斑点、小斑块会从蜡块中脱落 ,在切片上留下一个个的小空洞。这种情况在脱水、透明或浸蜡处理过度的组织中极易发生 ,如肝、脾、肾、脑、淋巴结以及子宫等组织标本 ,若取 材太薄 ,易造成处理过度 ,蜡块在粗修和切片时经常会出现空洞。所以 ,取材时标本的厚度要适中 ,不能太薄。切片时如果遇到此类蜡块 ,可将蜡块在冰盘冷却片刻或用湿的棉花沾一下 ,蜡块接触刀刃用力不能太猛太重 ,以减少这一人为现象的出现。如果发现蜡带上的组织切片出现空洞 ,只要蜡块中的组织充足 ,应尽量再缓慢切片 ,直到空洞消失。另外 , 空洞也可能是因为组织在浸蜡时 ,蜡液中有残留的空气存在 所致。这种情况在肺组织标本中尤为多见 ,即使连续切片空 洞也不容易消失。如果并非急诊病理诊断需要 ,可以放在空气中受热过夜 ,这对有照相需要的切片尤为有利。

染色和封片常用的染色方法是苏木素-伊红（Hematoxylin-Eosin）染色法，简称H.E染色法。这种方法对任何固定液固定的组织和应用各种包埋法的切片均可使用。苏木素是一种碱性染料,可使组织中的嗜碱性物质染成蓝色，如细胞核中的染色质等；伊红是一种酸性染料，可使组织中的嗜酸性物质染成红色，如多数细胞的胞质、核仁等在H.E染色的切片中均呈红色。H.E染色程序如下:脱蜡、脱苯、复水、染色、脱水、透明、封固常规苏木素染色中的对比染色是用伊红,近年来在英、美的一些实验室则采用焰红（phloxine）,此外也有用桔黄G（OrangeG）、比布里希猩红(Biebrich scarlet)、波尔多红(Bordeaux red)等作为对比染色。伊红为染胞质、胶原纤维、肌纤维、嗜酸性颗粒等常用的染料。湖南**组胚病理切片

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