天津品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒公司

时间:2023年11月04日 来源:

与BrdU检测方法相比,EdU检测方法用量小得多,十分之一的用量即可获得与BrdU检测试剂盒相同甚至更好的检测结果,而且小分子化学反应检测方法反应快,效率高,反应时间需几分钟,不需要DNA变性、蛋白酶处理、抗原抗体过夜孵育,能够更好地保护细胞形态,更简单、更灵敏、更快速、更准确。EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物,分子量很小,在动物体内能够迅速扩散到各种组织和中,并渗入正在复制的DNA分子,通过基于Apollo®荧光染料与EdU的特异性反应即可简单、快速、准确地检测出细胞增殖情况。EdU细胞增殖检测试剂盒多少钱?上海东寰告诉您!天津品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒公司

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以及酶或荧光偶联二抗,检测单细胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通过免疫荧光检测,后者通过荧光显微镜检测。优点是:使用核酸酶变性DNA,在不伤害细胞完整性的情况下使抗体结合BrdU。体内外均可进行标记,且可同时使用其他标记进行检测,操作安全简便。适用于贴壁或悬浮细胞,冰冻或福尔马林包埋组织切片。EdU与BrdU检测法不同,EdU-Click检测,如EdU-Click594(BCK-EDU594)无需进行DNA变性来检测掺入的EdU,而是通过一次快速、高度特异性的点击反应,将EdU高效地掺入到新合成的DNA之中,通过EdU与不同荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性,从而确地反映细胞的增殖情况。这一类细胞增殖用荧光标记采用温和的点击实验方案,准确且兼容各种抗体实验方案,整个实验可在30分钟内完成,在结果的数据丰富程度方面,堪比多重分析方法。品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒公司使用EdU细胞增殖检测试剂盒的好处有哪些?

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上海东寰生物科技有限公司即核苷渗入法。以前常用的核苷渗入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸类似物)法,但BrdU法的缺点是需要变性DNA后才能与抗体结合,导致了DNA双链结构的破坏,影响了其他染料的结合染色,导致染色弥散,准确性降低等问题。EdU法作为新型的核苷渗入法具有以下优点:安全—–不使用[3H]thymidine,无放射性污染。简单—–基于小分子化学反应的检测方法,简单高效,需三步:EdU孵育;细胞固定;荧光检测。无需DNA变性和孵育抗体。

    EdU细胞増殖检测试剂盒(红色荧光)使用说明产品简介细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。试剂盒组分产品编号试剂浓度试剂量保存条件EdU溶液1000X40ul室温运输,4℃长期储存,勿冻存。EdU细胞增殖检测试剂盒价格。

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    注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)孵育时间至少2小时,可延长至24小时后再检测也可以。4、以1×PBS清洗细胞两次,每次5分钟,以除去未掺入RNA的EU残留。注:贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。细胞的固定和通透1、每孔加入150μl细胞固定液,室温培养30分钟,弃固定液;注:1)该试剂盒配备了细胞固定液,也可以使用含4%多聚甲醛的PBS来进行细胞固定;2)如果使用其他的细胞固定剂建议用DEPC水来配置,避免RNA酶降解细胞内的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸,摇床孵育5分钟;3、弃甘氨酸溶液,每孔加入300μlPBS洗液,室温清洗5分钟;4、每孔加入300μlTritonX-100细胞通透液,室温通透10分钟,弃细胞通透溶液;5、每孔加入300μlPBS洗液,室温清洗5分钟;EU染色1、通过用10:1去离子水稀释10×反应缓冲液进行配制1×EU反应缓冲液;2、按照溶解200mg缓冲添加剂溶于1ml去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解,即为可用的缓冲添加剂的浓度,建议现用现配;注:缓冲添加剂为白色粉末,较难准确称量,称量范围可稍微放宽,但是不应超过±20%,且该粉末较易氧化,使用后请旋紧管盖,如试剂出现棕黄色,则需报废或更换。EdU细胞增殖检测试剂盒去哪买?北京品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒原理

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EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU标记培养基;(b)提前将2xEdU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得lxEdU溶液,其中EdU的终浓度为10uM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时,弃培养基;注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次,毎次5分钟,以除去未掺入DNA的EdU残留天津品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒公司

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