天津口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒公司
该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察;如果条件限制,请于4°C条件下避光湿润保存3天之内完成拍照。若为细胞爬片或涂片,可使用抗荧光淬灭封片剂进行封片后于4°C条件下保存及拍照检测。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。上海东寰向您介绍EdU细胞增殖检测试剂盒的好处。天津口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒公司
4%多聚甲醛固定液或冷**固定液(-20℃预冷20min)。d,封闭液。e,/LPBS缓冲液。2、染色方法a,取出培养有细胞的盖玻片,用洗2-3遍。b,加入4%多聚甲醛试问固定30minc.加入的Tritonx-100,37℃,5min,PBS洗两次,5min/次d.加入含、1%BSA的PBS中室温封闭30min-1h。e.去封闭液,直接加入一抗,37℃孵育1h或4℃过夜。抗体以mo/LPBS稀释(理想的抗体浓度需经试验而定)。,10min/次g.加入FITC-二抗或TRITC-二抗,37℃,孵育1h。,10min/次,用滤纸吸干。(PBS配制)封片。j.免疫荧光显微镜下观察,或于4℃避光保存。免疫荧光双标记方法免疫荧光的双标记是指同时标记细胞内两种蛋白质分子,当怀疑某种配体与已知受体结合后可用此方法加以证明。此方法稍微复杂一些,应注意所用的一抗是来自不同种属动物的两种特异性抗体(例如:A抗体为多克隆抗体,来自家兔;B抗体为单克隆抗体,来自小鼠)。其次,两种二抗所带荧光素的发射光不应重叠,且尽量远离,通常可以选择FITC和TRITC、Alex488和TRITC、FITC和Cy5,或Cy3和Cy5等来组合。通常情况下,染色时两种一抗可以同时孵育,然后可以同时孵育两种二抗。但当染色结果一种颜色非常弱,而另一种颜色比较强时,应考虑先孵育颜色较弱的二抗。北京正规EdU细胞增殖检测试剂盒优势上海东寰与您分享EdU细胞增殖检测试剂盒对如今市场的影响。
细胞活性的细胞增殖检测方法,能检测到细胞的总体增殖效果,但无法检测到单个的增殖细胞。这几种方法尽管都不是检测DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine掺入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于细胞荧光示踪的原理能检测到单个的增殖细胞,但由于每增殖一次荧光减弱一半,在荧光显微镜下较难区分荧光减弱一半的细胞,检测灵敏度不是很高,通常适用于流式细胞仪检测。在进行科学研究时,上述这些基于细胞活性或CFDASE的方法可以作为EdU法的补充性检测方法。
EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替T渗入正在复制的DNA分子,通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性,通过检测EdU标记便能准确地反映细胞的增殖情况。与BrdU检测方法相比,EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU检测染料只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)即可有效检测,可有效避免样品损伤,在细胞和组织水平能更准确地反映细胞增殖等现象上海东寰与您分享EdU细胞增殖检测试剂盒发挥的重要作用。
EU新生RNA检测试剂产品简介细胞内新生RNA的变化是评价细胞活性的重要指标。EU(5-Ethynyl-Uridine)是一种尿嘧啶核苷类似物,能够在细胞RNA转录时期代替尿嘧啶(U)掺入新合成的RNA分子中,然后通过基于EU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EU的RNA分子中,这样就可以进行较快的的荧光检测RNA的转录活性。本试剂盒将直接测定细胞内新生RNA的变化。传统的检测新生RNA的方法为以放射性同位素标记RNA等方法然后进行Southernblot进行检测。但是这种方法需要放射性同位素标记及后续的复杂操作步骤。利用EU标记新生RNA的检测方法不需要剧烈的RNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、RNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加便捷、灵敏和准确,能在细胞水**映新生RNA转录活性的状况。该试剂只需要简单的操作步骤,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜以及高内涵筛选仪进行新生RNA的转录活性。试剂组分产品编号试剂浓度试剂量C01901EU溶液1000×40μl细胞固定液1×15ml反应缓冲液10×1ml催化剂溶液25×400μlTAMRA红色荧光溶液400×25μl缓冲添加剂粉末200mgHoechst×20μl运输及保存方式蓝冰运输。-20℃避光长期保存。EdU细胞增殖检测试剂盒,有哪些好处值得选择?安徽口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒优势
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另一方面,EdU上的乙炔基能与生物素标记的叠氮化物(Biotinlabeledazide)通过一价铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Clickreaction),其反应原理参见图1。通过点击反应,新合成的DNA会被相应的生物素探针所标记,从而可以使用适当的检测设备检测到增殖的细胞。图1.BeyoClick™EdU检测法中的点击反应(Clickreaction)原理图。生物素或荧光探针等标记的叠氮化物(LabeledAzide)与掺入到细胞DNA中的EdU,在铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,终使细胞DNA标记上生物素等探针。本试剂盒反应简单、检测灵敏度高。本试剂盒基于简单高效的点击反应,无需DNA变性,只需少量的小分子叠氮化物探针即可非常有效地标记出掺入的EdU,并且可以检测到单个细胞的增殖情况。天津口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒公司
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